???? 2014年1月25日，國際學(xué)術(shù)期刊《Journal of Biological Chemistry》在線發(fā)表了黃河清教授課題組的研究論文“The Evidence of HeLa Cell Apoptosis Induced with Tetraethylammonium using Proteomics and Various Analytical Methods”。
???? 四乙胺（TEA）和四氨基吡啶（4-AP）均能高效阻斷細(xì)胞膜上的鉀離子通道，屬于鉀離子通道阻滯劑。該論文選用MTT、單染/雙染流式細(xì)胞術(shù)分別研究誘導(dǎo)人宮頸癌（Hela）細(xì)胞凋亡速率和變化趨勢，證實(shí)了這TEA和AP抑制劑能協(xié)同增強(qiáng)抑制Hela細(xì)胞凋亡速率。運(yùn)用細(xì)胞膜片鉗技術(shù)在全細(xì)胞模式下測定Hela細(xì)胞膜上的鉀電流變化趨勢和規(guī)律。MALDI -TOF MS技術(shù)證實(shí)TEA能改變Hela細(xì)胞膜表層的多肽分布與組成，可能是TEA能誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)差異蛋白質(zhì)或多肽。選用順鉑-人血清轉(zhuǎn)鐵蛋白誘導(dǎo)HepG2 肝癌細(xì)胞凋亡過程中所表達(dá)的26種差異蛋白質(zhì)為目標(biāo)蛋白，設(shè)計(jì)對應(yīng)的引物，研究在TEA和4-AP分別誘導(dǎo) Hela細(xì)胞凋亡過程中所產(chǎn)生mRNA表達(dá)情況與趨勢，并發(fā)現(xiàn)這26種蛋白質(zhì)均得到差異表達(dá)，可見TEA和4-AP類似其他抗腫瘤藥物，均通過相同或相似的途徑和機(jī)制誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。
??? 選用蛋白質(zhì)組學(xué)及相關(guān)分析技術(shù)篩選與鑒定出TEA誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡過程中的差異蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)33個蛋白表達(dá)量上存在顯著的差異，其中13個蛋白表達(dá)量上調(diào)，20個蛋白表達(dá)量下調(diào)。差異蛋白質(zhì)涉及ATP結(jié)合，分子伴侶，酶的活性，鉀鈣離子結(jié)合，細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)，氧化還原平衡，代謝等多種分子生物功能，通過差異蛋白的亞細(xì)胞定位發(fā)現(xiàn)，TEA主要的靶向位點(diǎn)為細(xì)胞質(zhì)蛋白。選用Ingenuity IPA軟件分析得到差異蛋白涵蓋細(xì)胞移動，腫瘤形成，細(xì)胞發(fā)育等蛋白網(wǎng)絡(luò)。采用western-blotting 分析谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSTO1）差異蛋白的表達(dá)水平，其表達(dá)量隨TEA濃度遞增而降低。Real-time PCR分析Hela表達(dá)的33種差異蛋白所對應(yīng)的mRNA水平、變化趨勢和規(guī)律基本上與2D-PAGE分離膠中蛋白質(zhì)表達(dá)量相似。這些結(jié)果進(jìn)一步佐證了采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選的由TEA誘導(dǎo)Hela細(xì)胞表達(dá)的差異蛋白的可靠性，揭示TEA不僅阻斷Hela鉀離子通道，而且在蛋白合成的過程中，通過影響細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。TEA屬于帶強(qiáng)毒性的抗腫瘤藥物，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制類似于臨床一線用藥。
??? 論文第一、二作者：黃琳（博士），黃清育（博士）；論文期刊：Journal of Biological Chemistry, 2014, 289:2217-2229.
?
（文/生命科學(xué)學(xué)院）
?
?
?
版權(quán)與免責(zé)聲明：本網(wǎng)頁的內(nèi)容由收集互聯(lián)網(wǎng)上公開發(fā)布的信息整理獲得。目的在于傳遞信息及分享，并不意味著贊同其觀點(diǎn)或證實(shí)其真實(shí)性，也不構(gòu)成其他建議。僅提供交流平臺，不為其版權(quán)負(fù)責(zé)。如涉及侵權(quán)，請聯(lián)系我們及時修改或刪除。郵箱：sales@allpeptide.com