生物素可以與親和素或者鏈霉親和素有力結(jié)合，結(jié)合強度甚至接近共價鍵。生物素標(biāo)記的肽通常用于免疫測定，組織細(xì)胞化學(xué)和基于熒光的流式細(xì)胞術(shù)。標(biāo)記的抗生物素抗體也可以用來結(jié)合生物素化多肽。生物素標(biāo)記常連接在賴氨酸側(cè)鏈或者N末端。通常在多肽和生物素之間使用6-氨基己酸作為紐帶，紐帶能夠靈活結(jié)合底物，并且在有空間位阻的情況下能結(jié)合地更好。專肽生物根據(jù)需求，向客戶提供具有不同位點生物素標(biāo)記多肽的定制合成。

專肽生物合成用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究的生物素化肽。盡管生物素可以在 N 端或 C 端引入（通過賴氨酸殘基），但我們建議使用 N 端修飾，因為它成本低、成功率高、周轉(zhuǎn)時間短且易于操作。因為多肽合成是從 C 端到 N 端合成的，因此，N 端修飾是 SPPS步驟的最后一步，不需要額外的特定縮合步驟。相比之下，C 端修飾需要額外的步驟，并且通常更復(fù)雜。當(dāng)然，原則上生物素可以定位在任何地方。

生物素可以通過多種不同的接頭或間隔物與肽分離。盡管如此，還是建議包含一個靈活的間隔物，例如 Ahx（一個 6 碳接頭），以使生物素標(biāo)簽更加穩(wěn)定或靈活。

專肽生物在 N 端或 C 端提供生物素化：生物素-N 端、賴氨酸-生物素-肽中間和賴氨酸-生物素-C 端。
專肽生物還可以使用 Ahx 接頭或長碳 (LC) 接頭提供生物素化：生物素-Ahx-N 末端、Lys-Ahx-生物素-肽中間、Lys-Ahx-生物素-C-末端。

（生物素結(jié)構(gòu)）

示例：
GRGDS在N端和C端標(biāo)記生物素的結(jié)構(gòu)展示。

1、GRGDS在N端標(biāo)記生物素，不增加Ahx 接頭

2、GRGDS在N端標(biāo)記生物素，增加一個Ahx 接頭

3、GRGDS在C端標(biāo)記生物素，不增加Ahx 接頭

4、GRGDS在C端標(biāo)記生物素，增加一個Ahx 接頭。

Specific substrate for cathepsin D (Km = 53 μM, kcat = 7.28 s?1, kcat/Km = 0.14 μM?1s?1) with a single cathepsin cleavage site between the two Phe residues. It is flanked by an N-terminal AMCA-fluorophore (7-amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid) and a C-terminal biotin moiety. After enzymatic hydrolysis the biotin-conjugated cleavage product and undigested substrate AMCA-EEKPISFFRLGK(Biotinyl)-amide can be removed with streptavidin-coated magnetic beads. The remaining fluorescent peptide in solution represents the amount of digested substrate. The versatility of this cathepsin D 'digest and pull down assay' is applicable for routine assays.