400-998-5282
專注多肽 服務(wù)科研
編號(hào):146490
CAS號(hào):
單字母:H2N-RKAAPATGGV-K(Me)3-KPHRYRPGTV-K(Biotin)-OH
生物素可以與親和素或者鏈霉親和素有力結(jié)合,結(jié)合強(qiáng)度甚至接近共價(jià)鍵。生物素標(biāo)記的肽通常用于免疫測(cè)定,組織細(xì)胞化學(xué)和基于熒光的流式細(xì)胞術(shù)。標(biāo)記的抗生物素抗體也可以用來(lái)結(jié)合生物素化多肽。生物素標(biāo)記常連接在賴氨酸側(cè)鏈或者N末端。通常在多肽和生物素之間使用6-氨基己酸作為紐帶,紐帶能夠靈活結(jié)合底物,并且在有空間位阻的情況下能結(jié)合地更好。專肽生物根據(jù)需求,向客戶提供具有不同位點(diǎn)生物素標(biāo)記多肽的定制合成。
專肽生物合成用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究的生物素化肽。盡管生物素可以在 N 端或 C 端引入(通過(guò)賴氨酸殘基),但我們建議使用 N 端修飾,因?yàn)樗杀镜?、成功率高、周轉(zhuǎn)時(shí)間短且易于操作。因?yàn)槎嚯暮铣墒菑?C 端到 N 端合成的,因此,N 端修飾是 SPPS步驟的最后一步,不需要額外的特定縮合步驟。相比之下,C 端修飾需要額外的步驟,并且通常更復(fù)雜。當(dāng)然,原則上生物素可以定位在任何地方。
生物素可以通過(guò)多種不同的接頭或間隔物與肽分離。盡管如此,還是建議包含一個(gè)靈活的間隔物,例如 Ahx(一個(gè) 6 碳接頭),以使生物素標(biāo)簽更加穩(wěn)定或靈活。
專肽生物在 N 端或 C 端提供生物素化:生物素-N 端、賴氨酸-生物素-肽中間和賴氨酸-生物素-C 端。
專肽生物還可以使用 Ahx 接頭或長(zhǎng)碳 (LC) 接頭提供生物素化:生物素-Ahx-N 末端、Lys-Ahx-生物素-肽中間、Lys-Ahx-生物素-C-末端。
(生物素結(jié)構(gòu))
示例:
GRGDS在N端和C端標(biāo)記生物素的結(jié)構(gòu)展示。
1、GRGDS在N端標(biāo)記生物素,不增加Ahx 接頭
2、GRGDS在N端標(biāo)記生物素,增加一個(gè)Ahx 接頭
3、GRGDS在C端標(biāo)記生物素,不增加Ahx 接頭
4、GRGDS在C端標(biāo)記生物素,增加一個(gè)Ahx 接頭。
甲基化修飾多肽
也叫甲基化標(biāo)記多肽,甲基化修飾是在其他常見的翻譯后修飾(PTMs)中生物和物理化學(xué)特性方面非常突出的一種修飾手段。幾乎參與細(xì)胞所有的生命活動(dòng)過(guò)程,發(fā)揮著重要的調(diào)控作用,蛋白質(zhì)在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下將甲基轉(zhuǎn)移至特定的氨基酸殘基上共價(jià)結(jié)合的過(guò)程。甲基化是一種可逆的修飾過(guò)程,由去甲基化酶催化去甲基化作用??梢园l(fā)生在20個(gè)常見氨基酸殘基中的至少9個(gè)(Met, Cys, Lys, Arg, His, Gln, Asn, Glu and Asp)氨基酸中,而最常見甲基化/去甲基化主要發(fā)生在賴氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)側(cè)鏈上,幾乎參與生物所有的生命活動(dòng)過(guò)程,如調(diào)節(jié)細(xì)胞功能,如轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。甲基化修飾能夠發(fā)生在不同的氨基酸位點(diǎn),或是在同一個(gè)氨基酸位點(diǎn)產(chǎn)生不止一個(gè)甲基化修飾。
研究發(fā)現(xiàn),常見甲基化/去甲基化作用的氨基酸主要是賴氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)研究表明,組蛋白賴氨酸甲基化修飾執(zhí)行著多種生物學(xué)功能,如干細(xì)胞的維持和分化、X染色體失活、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和DNA損傷反應(yīng)等,主要是影響染色質(zhì)濃縮,抑制基因表達(dá)。組蛋白精氨酸甲基化在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮著重要作用,并能影響細(xì)胞的多種生理過(guò)程,包括DNA修復(fù)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞發(fā)育及癌癥發(fā)生等因此專肽生物特地開發(fā)甲基化修飾多肽技術(shù),為科學(xué)家在蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMS)的研究中提供幫助。
甲基化修飾(Me1,Me2,Me3)
采用高品質(zhì)的Fmoc-Lys(Me,Boc)-OH、 Fmoc-Lys(Me2)-OH、Fmoc-Lys(Me3)-OH.HCL、Fmoc-Arg(Me,Pbf)-OH 、Fmoc-Arg(me)2-OH.HCl(asymmetrical) 、Fmoc-Arg(me)2-OH.HCl(symmetrical) 等原料,采用Fmoc固相合成工藝合成,得到Lys甲基化,Arg甲基化標(biāo)記的多肽,使用HPLC 對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行純化。最終產(chǎn)品提供相應(yīng)的質(zhì)譜圖,純度分析的HPLC 色譜圖。